CD45 엑손 6결손 마우스에서의 대식세포 기능
Macrophage Fuctions in CD45 Exon 6 Deficient Mice
양성열, 키시하라겐지, 노모토기쿠오,
소속 상세정보
양성열 ( )
가톨릭대학교 의과대학 소아과학교실
키시하라겐지 ( )
큐슈대학교 생체방어 의학연구소
노모토기쿠오 ( )
큐슈대학교 생체방어 의학연구소
KMID : 0357119950170040285
Abstract
최근 세포의 발생, 분화 및 활성화에 관여하는 여러가지 항원이 잇달아 gene targeting 됨
으로써 각 항원의 기능이 보다 명확히 파악할 수 있게 되었다. CD45 엑손 6 결손 마우스를
분석 함으로 CD45가 T세포의 발생 및 분화에 매우 중요한 역할을 하며, 임파구의 항원 수
용체를 통한 신호 전달에 불가결하다는 사실등이 밝혀졌고 그밖의 생체내 기능에 대해 연구
가 진행되고 있다. 대식세포에서의 CD45의 역할을 알아보기 위해 CD45 엑손6 결손 마우스
(C57BL/7 유래)의 대식세포에서 단일항체를 이용한 세포표면 항원 발현의 FACS분석,
RT-PCR법에 의한 모노카인의 생산, OVA면역 T임파구를 사용한 항원제시능, 면양적혈구
및 형광체 피복 latex beads를 이용한 탐식능과 p815 mastocytoma 세포주를 이용한 항종양
세포저지능을 측정후 정상 마우스(C57BL/6)의 대식세포와 비교 분석하여 다음과 같은 결과
를 얻었다.
1. 대식세포 표면 항원(F4/80과 Mac-1)과 Iab의 발현에는 두군간에 차이가
없었으나 CD45 엑손 6 결손 마우스에서 CD45의 발현은 볼 수 없었다.
2. 모노카인(IL-1α, IL-6, TNF-α, JE TGF-β, Eta-l, IFN-α, GM-CSF, M-CSF-lR,
G-CSF-R) 및 NOS의 발현에서는 두군간에 차이가 없었다
3. 항원제시능에서는 CD45 엑손 6 결손 마우스와 정상 마우스간의 유의한 차이를 볼 수
없었다
4. 탐식능에서도 두 군간의 유의한 차이는 없었다.
5. 대식세포를 IFW-γ로 활성화한 실험에서는 CD45엑손 6결손 마우스 유래 대식세포에
서 항종양 제지능이 정상 마우스 대식세포에 비해 유의하게 낮았으나, LPS로 활성화한 실
험에서는 반대로 유의하게 높았다.
이상의 결과로보아 CD45가 대식세포의 활성과 기능에 결정적인 역활은 하지않았으나 활
성화된 대식세포의 항종양 기전에 관여하며, 대식세포의 IFN-γ와 LPS에 의한 활성화 기전
에서 서로 반대로 작용할 수 있다는 것을 시사한다.
#초록#
CD45, a membrane protein tyrosine phosphatase(PTP), is expressed in multiple
isoforms on all nucleated hematopoietic cells. The diversity of CD45 isoforms is
generated by alterative splicing of variable exons(mainly econ 4∼6). It is suggested that
CD45 is one of the most important molecules for signal transduction of hematopoietic
cells. Thus, it is supposed that CD45 dephosphorylates a phosphotyrosyl residue of a
negative regulation site located commonly in C-terminal portions of torc family protein
tyrosine kinases followed by the activation of the kineses. Previously, critical roles of
CD45 in a signaling pathway mediated by antigen receptors expressed on lymphocytes
have been demonstrated in CD45 axon 6-deficient mice(CD45-/-mice)
generated by gene targeting technology. However, the significance of CD45 in
macrophage differentiation and functions is still unknown. In this study, we approached
these problems by analyzing macrophage activation and functions in CD45 exon
6-deficient mice. The results were described as follows:
1. The expression levels of the lineage-specific surface antigens (F4/80 and Macl-α)
and MHC class II (lab) molecule on proteose peptone-induced macrophages
from peritoneal cavities of CD45-/-mice were not significantly different
from those from normal mice except the CD45 surface expression was undetectable in
CD45-/-mice.
2. As the results of quantitative RT-PCR analysis, the gene expression of
monokines(IL-1α, IL∼6, TNF-α, Eta-1, JE, IFN-α, GM-CSF, CSF-R and G-CSF-R)
and inducible nitric oxide synthase (iNOS) in unstimulated and LPS-or IFN-γ
-stimulated macrophages from peritoneal exudate cells of CD45-/- mice
showed no significant difference that from normal mice.
3. The antigen presentation ability of macrophages from CD45-/-mice
was comparable to that from normal mice.
4. No significant difference of phagocytic activities was observed in macrophages from
CD45-/- and normal mice using latex particles.
5. In the cytostasis assay using P8l5 mastcytoma cell line as target cells, IFN-γ
-stimulated macrophages except CD45 expression showed a significant decrease of
cytostatic activity, while LPS-stimulated macrophages except CD45 had an more
enhanced cytostatic activity than the, normal control.
6. No difference in nitric oxide production and was observed in LPS-or IFN-γ
-stimulated macrophages despite CD45 expression.
These results suggest that CD45 in not crucial for macrophage activation and
functions. However, differential influence of CD45 defect was observed in cytostatic
activity in LPS-or IFN-γ-stimulated macrophages implying CD45 may be involved in
the regulation mechanism to induce cytostatic activity in macrophages by LPS or IFN-
γ.
CD45; Protein tyrosine phosphotase; Gene tasseling; Macrophage; Monokine; Antigen presentation; Phagocytosis; Cytostasis; No.;
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