동결난자를 이용한 Sperm Penetrating Assay의 확립을 위한 단계적 연구
The Establishment of Sperm Penetration Assay Using Cryopreserved Hamster Oocyte
소속 상세정보
손환철/Hwancheol Son
조규선/김청미/정정윤/백재승/Kyu Seon Cho/Chung Mi Kim/Jung Yun Jung/Jae-Seung Paick
KMID : 0358319970380121355
Abstract
결론
1. SPA는 복잡한 준비 과정과 실험간의 변이 등 여러 문제점이 지적되고 있으나, 정자의
수정능력을 가장 정확히 파악할 수 있는 생물학적인 검사의 하나로 인정받고 있다. 저자들
은 단계적 연구를 거쳐 준비 과점이 비교적 간편한 동결난자를 이 용한 SPA를 확립하였다.
즉 신선 햄스터 난자를 이용한 햄스터 동종간의 SPA를 먼저 확립한 후 동결 햄스터 난자
를 이용한 햄스터 동종간의 SPA를 확립하였고, 이어 신선 햄스터 난자를 이용하여 사람 정
자와의 SPA를 확립하였으며, 마지막으로 동결 햄스터 난자를 이용하여 사람 정자와의 SPA
를 확립하였다.
2. 햄스터 정자와 동종 배양 후 신선난자에서 정자침투지수는 22.4±1.8, 침투율은 100±
0% 였으며, 동결난자에서 정자침 투지 수는 14.1 ±2.9, 침투율은 100±0%로 침투율은 차이
가 없었으나 침투한 정자의 슷자는 신선난자보다 동결난자가 적었다. 또한 품종배양에서 시
간경과에 따른 신선 난자와 동결난자의 침투정도를 비교하였을 때 약 1시간가량의 침투지연
이 관찰되었다. 하지만 사람 정자와 배양 후 신선난자에서 정자침투지수는 2.78±2.6, 침투율
은 79.5±10% 였으며, 동결 난자에서 정자침투지수는 2.82±2.7, 침투율은 73.9 ± 16%로 신
선난자와 동결난자간의 통계학적인 차이는 없었다.
3. 이상의 과정을 통하여 저자들은 사람 정자에서 동결 햄스터 난자를 이용한 SPA를 확
립하였으며, 햄스터 정자는 추후 SPA가 불임환자에 대한 임상검사와 연구에 활용될 때 대
조군 및 정도관리에 이용될 수 있으리라 생각된다.
#초록#
To establish sperm penetrating assay (SPA) with using cryopreserved hamster oocyte,
we performed the stepwise SPA with 1) fresh hamster oocyte and hamster sperm, 2)
cryopreserved hamster oocyte and hamster sperm, 3) fresh hamster oocyte and human
sperm, and 4) cryopreserved hamster oocyte and human sperm, in 4 cases of male
hamster and 12 cases of fertile human.
In SPA of hamster sperm with fresh hamster oocyte, the oocyte penetration rate (PR)
were 100±0%, and the penetration index(mean penetration per oocyte, PI) was 22.4±
1.8. In SPA of hamster sperm with cryopreserved hamster oocyte, the PR were 100±
0%, and the PI was 14.1±2.9 (p<0.01).
When the oocytes were examined at 1, 2, 3, and 6 hour post insemination, hamster
sperm penetration was 1 hour slower in cryopreserved oocytes than in fresh ones.
In SPA of human sperm with fresh hamster oocyte, the PR was 79.5±10%, and the
PI was 2.78±2.6. In SPA of hamster sperm with cryopreserved hamster oocyte, the PR
was 73.9± 16%, and the PI was 2.82 ± 2.7. There's no significant difference in SPA
using human sperm.
These results suggest that there may be some functional damages on cryopreserved
oocyte, because PI of fresh oocytes is higher than that of cryopreserved oocytes.
However in sperm of human, it dose not make significant difference in PI between fresh
and cryopreseNed oocytes. The SPA using cryopreserved hamster oocyte would appear
to have wide application of the evaluation of infertility, the assessment of the treatment
of infertility and the experiment in infertility field.
키워드
Sperm penetration assay; Cryopreserved oocyte; Hamster; Infertility;
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