사람의 정상 요로상피 배양세포에서 NFκB(Nuclear Factor Kappa B)의 활성도
Inducible Activation of NFκB on Cultured Normal Human Urothelial Cells
신명식, 이만휘,
소속 상세정보
신명식 ( )
가톨릭대학교 의과대학 의공학교실
이만휘 ( )
USA The Cleveland Clinic Foundation Department of Urology
KMID : 0358319990400030303
Abstract
서론
요로상피세포의 배양은 요로 상피의 발암기전, 생리학적 특성, 면역학적 기전을 연구하는
데 중요한 역할을 하나, 세포 배양에 필요한 방법론적인 문제와 사용조직 및 배양액 등의
문제로 몇몇 제한된 실험실에서만 행하여지고 있다. 요관이나 방광에서 얻어질 조직 절편을
이용하여 상피세포를 배양하기 위해서는 활성세포, 섬유세포의 증식을 억제하고 요로상피세
포 배양하여야 한다. 이를 위해 최근 배양액의 조건 맞추어 주고 상피세포외 특징인 keratin
의 발현을 확인하는 면역 조직염색을 함으로써 이러한 문제점들이 많이 해결되고 있다. 요
관과 방광의 요로상피세포는 형태학적, 면역조직화학적으로 유사하나 요관의 상피세포는 태
생학적으로 중배엽성(mesoderm)으로서 내배엽성(endoderm)인 방광의 상피세포와는 다르므
로 요관과 방광의 상피세포가 분자생물학적인 반응에서 차이를 나타낼 수 있는 개연성이 있
다. 요로가 건강 상태를 유지하기 위해서는 요로의 상피세포들이 장벽을 이루어 외부 독성
물질들에 대하여 수동적인 방어를 해야하고 cytokine들을 생산하거나 cellular surface
marker들을 발현시킴으로써 면역 기능을 수행하여야 한다 nuclear factor kappa B(NFκB)
는 immunoglobulin 유전자의 kappa light chain에 있는 DNA에 결합하는 전사인자
(transcription factor)로서 면역 유전자의 발현에 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있다.
NFκB는 처음에 쥐의 B임파구에서 kappa light chain유전자의 조절자로서 발견이 되었는데
뒤이어 T임파구나 단핵구, 대식세포 등의 세포들에서도 존재한다는 것이 알려졌고 사람의
방광이행상피 세포암 세포주에서도 존재가 확인되었다. 이에 저자들은 환자의 정상 요관과
방광에서 절편을 채취하여 세포 배양을 하고 염증 유발물질인 lipopolysaccharide(LPS),
interferons(INFs), tumor necrosis factor(TNF)들을 투여하여 요관과 방광의 상피 세포에서
NFκB의 존재 및 활성화 양상을 비교 관찰하고 향후 면역치료의 임상 적용에 도움을 받고
자 하였다.
Purpose: T investigated the inducible response of transcription factor Nuclear Factor
Kappa B(NFκB) ,in response to lipopolysaccharide(LPS), interferons(INFs), and tumor
necrosis factor(TNF) on the normal urothelial cells derived from ureter and the bladder.
Materials and Methods: Urothelial cells were harvested from the ureter and the
bladder, cultured, passaged ,and expanded in serum free medium. Immunostaining of the
urothelial cells with reacting anti-cytokeratin antibodies was done no to identify a stable
epithelial phenotype. Cultured human urothelial cells were either untreated and treated
with LPS, INFγ, INFα and TNFα. Cell extracts were prepared and used for
electrophoretic mobility shift assay (EMSA) using PRO Ⅱ-χB as probes for NFχB
respectively.
Results : We cultured urothelial cells successfully confirmed by immunohistochemical
staining. In both urothelial cell types, NFχB bindings with their respective were induced
by treatment with LPS, INFγ and TNFα. NFχB was weakly induced by INFα. For
the NFχB complex, a distinctly different migrating pattern of the NFχB was noted
between the different urothelial cells.
Conclusions: Many urothelial diseases are unique to specific areas of the urinary
collecting system. The characterization of different inducible responses of transcription
factors involved in cytoplasmic and nuclear signaling of genes encoding immunologically
relevant proteins provide a unique opportunity for understanding disease presentation and
designing specific treatment interventions.
키워드
Urothelium; Cell culture; NFκB;
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