Protein Kinase C의 활성화가 백서 뇌 기저동맥 평활근 세포의 칼슘의존성 포타슘 전류에 미치는 효과
The Effect of Activation of Protein Kinase C on the Calcium-dependent K+ Current in Bat Basilar Smooth Muscle Cells
소속 상세정보
김철진/Chul Jin Kim
KMID : 0359819990280091272
Abstract
목적 :
Protein kinase C(PKC)의 활성화는 뇌혈관 연축의 발전에 확실한 역할을 할 수가 있다.
하지만 이의 기전은 명확하지가 않다. 본 연구는 신선하게 적출된 백서의 뇌 기저동맥 평활
근세포에서 칼슘의존성 포타슘 이온 통로와 세포내 칼슘농도에 대한 protein kinase C의 작
용을 규명하기 위해 시행되었다.
방법 :
Whole cell patch clamp와 calcium microfluorimetry방법이 칼슘의존성 포타슘 이온 통로
와 세포내 칼슘농도를 측정하는데 이용되었다.
결과 :
Patch clamp연구에서, 분극소실은 카페인과 A23187에 민감한 외향성 포타슘 이온 통로의
전류를 생성했는데, 이 전류는 TEA(tetraethylammonium)엔 봉쇄되었지만 glibenclamide엔
봉쇄되지 않았다. PMA(phorbol 12-myristate), PDB(phorbol 12,13-dibutyrate)에 의한 PKC
의 활성화는 포타슘 이온 통로의 전류를 용량의존적으로 증가시켰다. Phorbol esters의 존재
하에 TEA를 줄때 Phorbol esters에 의해 활성화된 포타슘 이온 통로의 전류를 감소시켰으
나 glibenclamide는 감소시키지 않았다. PKC 차단제인 H-7을 전처치시에 포타슘 이온 통로
의 전류에 대한 phorbol ester의 효과를 예방하였다. Calcium microfluorimetry연구에서,
PMA(100n㏖/1)는 세포내 칼슘 농도를 증가시켰고, 이 효과는 H-7을 전처치에 의해 예방되
었다.
결론 :
우리는 PKC의 활성화가 세포내 칼슘농도를 증가시키고 세포내 칼슘의 증가가 뇌혈관 평
활근 세포의 포타슘 이온 통로를 활성화 시킨다는 결론을 얻었다.
#초록#
Objective Activation of protein kinase C(PKC) may play a certain role in the
development of cerebral vasospasm. However this mechanism still elusive. This study
was undertaken to investigate the action of protein kinase C on calcium-dependent
K+< channels(KCa) and internal calcium concentration
(Ca2+)iin freshly isolated smooth muscle cells.
Methods : Whole-cell patch clamp and calcium microfluorimetry technique were used
for measuring the KCa and internal calcium concentration.
Results : In patch-clamp studies. depolarization evoked an outward KCa
current which is sensitive to caffeine and A23187, and shown to be blocked by
TEA(tetraethylammonium) but not by glibenclamide. Activation of protein kinase C by
phorbol 12-myristate 13-acetate(PMA : 1-100n㏖/1) and phorbol 12, 13-dibutyrate(PDB :
1-100n㏖/1) dose-dependently enhanced KCa current. Subsequent
application of TEA(10-30m㏖/1) but not glibenclamide(3-6μ㏖/1), in the presence of
phorbol esters. reduced the potassium current activated by phorbol esters. Pre-incubation
with 1-(5-isoquinoline sulphonyl)-2-methylpiperazine(H-7 : 10μ㏖/1). a protein kinase C
inhibitor, prevented the effect of phorbol esters on KCa. In calcium
microfluorimetric studied, PMA(100n㏖/1) increased intracellular calcium concentration
and this effect of PMA was prevented by pre-incubation of cells with H-7(10 μ㏖/1).
Conclusion : These results indicate that activation of PKC increase intracellular
calcium concentration and elevation of internal calcium concentration activates
KCa in cerebral vascular smooth muscle cells.
키워드
Protein kinase C; 칼슘의존성 포타슘 통로; Patch clamp; Microfluorimetry; Protein kinase C; Calcium-dependent potassium channel; Patch clamp; Microfluorimetry;
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