배양망막색소상피세포에서 자외선에 의한 산화손상
Oxidative Damage induced by UV in Cultured Retinal Pigment Epithelial Cells
대한안과학회지 2003년 44권 12호 p.2890 ~ 2895
유형곤, 최경식, 허장원, 김관창, 김영주, 정예선, 유영석,
소속 상세정보
유형곤 ( )
서울대학교 의과대학 안과학교실
최경식 ( )
서울대학교 의과대학 안과학교실
허장원 ( )
서울대학교 의과대학 안과학교실
김관창 ( )
서울대학교 의과대학 안과학교실
김영주 ( )
서울대학교 의과대학 안과학교실
정예선 ( )
서울대학교 의과대학 안과학교실
유영석 ( )
서울대학교 의과대학 안과학교실
KMID : 0360220030440122890
Abstract
목적 : 연령관련황반변성에 있어서 여러 발생 인자 중 망막색소상피세포의 사멸이 관련된 것으로 알려져 있다. 본 연구에서는 자외선이 망막색소상피세포의 사멸을 유발하는지 알아보고 이때 반응산소기가 증가되는지 알아보고자 하였다.
대상과 방법 : 배양망막색소상피세포를 well-plate에 일정한 수로 넣고 24시간 동안 부착시킨 후 자외선을 0-80 mJ/㎠의 양으로 조사하였다. 조사 후 일정한 시간 간격으로 생존 세포수를 경정하고 annexin V, propidium icdide(Pt)를 이용한 유세포분석을 시행하여 apoptosis의 정도를 결정하였다. 또한 세포내 반응산소기의 발생량을 DCFHDA를 이용하여 정량화하였다.
결과 : 자외선의 조사량이 증가할수록 망막색소상피세포의 사멸이 증가하여 40 mJ/㎠의 양으로 조사한 경우에 24시간후 20~30%의 세포 사멸이 일어났다. 유세포분석에서 annexin V 양성 세포의 분율이 조사 후 시간이 경과할수록 증가하였다. 또한 자외선을 조사한 경우에 반응 산소기가 증가하였다.
결론 : 이상의 결과는 자외선 조사에 의한 산화 손상이 망막색소상피세포의 사멸 원인으로 중요한 역할을 할 가능성을 시사한다.
<한안지 44(12):2890-2895, 2003>
Purpose: The death of retinal pigment epithelial(RPE) cells plays an important role in the development of age-related macular degeneration. We studied whether ultraviolet could induce apoptotic cell death and the increase of reactive oxygen intermediates (ROI) in the RPE cells.
Methods: Cultured human RPE cells were exposed to doses of between 0 and 80 mJ/cm2 UVB as an attached monolayer. The number of viable cells was assessed by trypan blue assay. The apoptosis was determined by flow cytometry using annexin V and propidium iodide (PI). Intracellular ROI was measured using DCFH-DA.
Results: UVB-exposed cells showed a dose-dependent cell death. The number of cells decreased in 20?30% at the dose of 40 mJ/cm2 UVB 24 hours after UVB exposure. The proportion of annexin V positive cells and intracellular ROI increased after UVB exposure.
Conclusions: These results suggest that UV induced oxidative damage may be one of the important mechanisms of RPE cell death.
J Korean Ophthalmol Soc 44(12):2890-2895, 2003
키워드
Apoptosis;Oxidative damage;Retinal pigment epithelium;UV
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