LASIK에서 20% 에탄올의 처리에 의한 각막의 변화
The Change of Cornea after 20% Ethanol Treatment in LASEK
대한안과학회지 2003년 44권 12호 p.2911 ~ 2918
박희숙, 김도현, 김재호,
소속 상세정보
박희숙 ( )
가톨릭대학교 의과대학 안과학교실
김도현 ( )
가톨릭대학교 의과대학 안과학교실
김재호 ( )
인제대학교 의과대학 서울백병원
KMID : 0360220030440122911
Abstract
목적 : LASEK에서 에탄올이 각막상피와 기질에 미치는 영향과 그 변화를 알아보고자 한다.
대상과 방법 : 배양각막상피세포를 이용하여 에탄올의 다양한 농도와 처리시간에 따른 세포생존율을 알아본다. 쥐 안구에 20% 에탄올을 30초간 처리하고 정해진 시간(0, 4, 8, 12시간, 1, 3, 7일)에 각막을 적출하여 각막의 변화를 관찰하고 상피와 기질의 세포사를 확인한다.
결과 : In vitro에서 상피세포는 에탈올을 20%(76.2±7.4%)이하의 농도로 30초간 처리하거나 20% 에탄올을 1분(54.8±6.5%)이내로 처리했을 때 50% 이상의 생존율을 보였다. In vivo에서는 20% 에탄올을 30초간 처리한 직후에 적출된 각막의 상피세포내에 액포가 관찰되었으나 4시간 이후부터 점차 사라졌으며, trephine한 경계부분에서 8시간까지 세포사가 관찰되었다. 에탄올 처리 후 기저세포의 절반부착반은 모든 시간대에서 관찰되었다.
결론 : 쥐 안구를 이용한 본 연구에서, LASEK에서 절편제작 시 에탄올의 처리안으로는 상피절편의 손상이 미비하며, trephine하거나 절편을 취급 할 때의 물리적인 요인들이 술 후 세포의 생존을 좌우할 것으로 생각된다.
<한안지 44(12):2911-2918, 2003>
Purpose: Recently, 20% o ethanol has been used to make a corneal epithelial flap effectively. We investigated the toxicity of ethanol using the corneal epithelial cell line and rat cornea.
Methods: Cultured corneal epithelial cells were exposed to different concentrations (5~60%) of ethanol for different exposure time (20~120 seconds). And then cell viability was measured with MIT assay. In vivo, rat central corneas (3mm in diameter) were exposed to 20% ethanol for 30 seconds. The eyes were enucleated, fixed and processed for light microscopy (LM) and transmission electron microscopy (TEM) at indicated interval (0, 4, 8 and 12hours, 1, 3 and 7 days). TUNEL assay was used to detect apoptotic cells.
Results: Cultured epithelial cells showed survival rate of over 50% in ethanol concentration of below 20% (76.2±7.4%) and exposure time of below 1 minute (54.8±6.5%). In vivo experiment, after 20% ethanol exposure for 30 seconds, vacuoles were detected in the nuclei of epithelial cells and gradually disappeared. Hemidesmosomes were detected in the basement membrane at all times. TUNEL positive cells were detected in the ´epithelial layer and anterior stroma at the edge until 8hrs.
Conclusions: Our results showed 20% ethanol exposure for 30 seconds did not seems to induce significant damage to the cornea. Corneal epithelial damage could occur by physical force during epithelial- flap making.
J Korean Ophthalmol Soc 44(12):2911-2918, 2003 ´
키워드
Alcohol toxicity;Corneal epithelial cell;LASEK
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