대장암 세포주에 대한 담즙산의 독성
Toxicity of Bile Acids on Colon Cancer Cell Lines
대한암학회지 1999년 31권 1호 p.126 ~ 133
소속 상세정보
박동국/Dong Kook Park
신지현/전호진/김경재/이찬영/박동국/Ji Hyun Shin/Ho Jin Jun/Kyung Jae Kim/Chan Young Lee/Dong Kook Park
KMID : 0360319990310010126
Abstract
서론
대장암의 원인으로 많은 요인들이 작용하지만 대장암은 동물성 지방의 함량이 많은 식사
와 관계가 있다. 이는 아마도 음식에 있는 고함량의 지방이 대장에서 이차 담즙산의 생산을
많게 하고 이러한 이차 담즙산이 세포의 증식을 증가시켜 암화 과정에 관여하는 것으로 생
각된다. Cheah의 조사 연구에 의하면 담즙산, 식이 지방(oxidized fat), 대변의 변이 유발 요
인, ketosteriod 등이 대장암의 원인으로 가장 광범위하게 연구되는 요소들이며 다른 분야들
-즉, 인구 비교, 동물실험, 세균실험, 포유동물 세포주에 대한 실험, DNA 손상 실험- 등에
관계된 87개의 연구들을 종합한 결과 담즙산이 대장암의 가장 강력한 요인이라 하였다.
대장내 세균에 의하여 일차 담즙산이 이차 담즙산으로 변하며 이차 담즙산 -특히
lithocholic acid와 deoxycholic acid- 이 실험모델에서 대장 상피 세포의 증식을 일으키며
암화 과정을 촉진한다고 알려졌다. 또한 대장 용종 환자에서 건강한 사람보다 혈액내, 담즙
내의 deoxycholic acid의 농도가 높다고 하지만 대장 상피 세포에 대한 담즙산의 정량적 독
성은 비교적 잘 알려져 있지 않다. 또한 담즙산의 종류에 따라 대장 점막의 손상 정도 및
암화 과정에 미치는 영향도 다를 것이므로 담즙산간의 상대적인 독성의 결과와 담즙산의 노
출시간에 따른 독성들도 중요할 것으로 생각된다.
이에 저자들은 1차, 2차 담즙산 각각에 단기간 노출과 장기간 노출에 따른 담즙산의 대장
암 세포주에 미치는 세포 독성을 MTS
((3,-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxy-methoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetraz
olium, inner salt) 방법으로 측정하여 가장 독성이 강한 담즙산을 알아내고 이 대장암 세포
주에 대한 독성이 단지 세정제(detergent)로서의 작용으로 세포들을 괴사시키는 것인지 혹
은 apoptosis에 의한 세포사인지를 확인하기 위하여 세포주에서 DNA를 추출하여 겔 전기
영동을 시행하여 apoptosis의 특징적 소견중의 하나인 DNA의 internucleosomal step ladder
형태를 관찰하고자 하였다.
Purpose: Cytotoxicity of the bile acids on colon cancer cell lines was studied to allow
which bile acid was most cytotoxic to colonic mucosal epithelium. We performed agarose
gel electrophoresis whether this toxicity was caused by detergent effect of the bile acids
or by apoptotic pathway.
Material and Methods: HT29, LoVo, Sw620 colon cancer cell lines were exposed to
lithocholate, cholate, deoxycholate and chenodeoxycholate with 50, 100, 150, 200, 250, 300
μM as final concentration in DMEM; culture media for short time (for 2 hours) and for
long time (for 5 days). Agarose gel electrophoresis was performed on each colon cancer
cell lines (HT29, LoVo, Sw620, Sw480) after 1, 2, 3, 4, 5 days exposure to deoxycholate
with 150 μM concentration to detect internucleosomal fragmentation.
Results: There was no toxicity after short time exposure in all bile acids concentration
and in all colon cancer cell lines. Of the bile acids, deoxycholate was most toxic for all
colon cancer cell lines. And DNA fragmentation was noticed after 2 days exposure with
deoxycholate. Only LoVo cell line showed apoptotic DNA pattern after 4 days of
exposure with deoxycholate.
Conclusion: Bile acids (especially deoxycholate) are suggested to be possible agents to
cause apoptosis in colonic mucosal epithelium.
키워드
Bile acids; Cytotoxicity; Apoptosis; Colon cancer; MTS;
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