Helicobacter pylori로부터 분리한 마이크로소옴의 ATPase 활성
ATPase Activity of Microsomes Prepared from Helicobacter pylori
소속 상세정보
홍원선/Won Sun Hong
정훈용/양석균/명승재/김진호/민영일/조형진/사공정/박승필/김혜원/Hoon Yong Jung/Suk Gyun Yang/Seung Jae Myung/Jin Ho Kim/Young Il Min/Hyung Jin Jo/Gong Jung Sa/Seung Pil Park/Hye Won Kim
KMID : 0614620000360060728
Abstract
목적 : Helicobacter pylori (H. pylori)가 낮은 pH
에서 생존할 수 있는 주 기전은 요소분해효소
(urease)를 갖고 있기 때문인데,최근 ATPase (pro-ton
pump)도 존재하는 것이 보고되었다. 본 연구에
서는 H. pylori 에 존재하는 ATPase 의 특성을 알아보
고자 하였다. 대상 및 방법 : H. pylori (ATCC
43504)로부터 막소체가 포함된 마이크로소옴 (micro-somes)
을 분리하여, enzyme-coupled assay 로 ATPase
활성을 측정하였다. F type ATPase 에 대한 특이적
억제제인 sodium azide (NaN3)와 N,N-dicyclohexyl-carbodiimide
(DCCD), P type ATPase 에 대한 특이
적 억제제인 diethylstilbestrol (DES)과 V type ATPase
억제제인 bafilomycin 이 마이크로소옴의 ATPase 활
성에 미치는 영향을 측정하였다. DES 가 H. pylori
생존에 미치는 영향과 proton ionophore 인 nigericin
이 ATPase 활성에 미치는 영향도 측정하였다. 결
과 : H. pylori 마이크로소옴의 ATPase 활성을 pH
4-8 에서 측정하였는데, ATPase 활성은 pH 5.5 에서
최고치를 보였다. pH 7 에서 측정한 H. pylori 마이
크로소옴의 ATPase 활성치는 430 ±34.4 nmol/mi
n ·mg protein 이었다. NaN3 10 mM, DCCD 10 mM
과 DES 100 μM 을 첨가하였을 때, ATPase 활성은
각각 29%, 38%와 42%가 감소하였다. 한면 ba-filomycin
1 μM 을 첨가한 경우에는 ATPase 활성의
유의한 변화가 없었다. DES 는 H. pylori 의 생존율과
ATPase 활성을 감소시켰다. Nigericin 10 μM 로 처
리한 경우 ATPase 활성은 26%증가하였다. 결론 :
H. pylori 세포막에는 F type 과 P type ATPase 가 존
재하며, 이 ATPase 는 H+ ATPase 일 것을 시사하였
다. 이 결과는 H. pylori 는 몸 내부로 침투한 H+을 F
type ATPase 가 생산한 ATP 를 사용하여 P type
ATPase 로 빠르게 몸 밖으로 배출하여 산성 환경에 서 생존할 수 있는 것으로 생각된다
Background/Aims: Helicobacter pylori(H. pylori) is unique in its ability to persist in acidic environment. The main mechanisms to survive in low pH are to produce large amounts of urease and to have ATPases. This study was performed to invetigate
the
characteristics of ATPases of H. pylori. Methods: ATPase activity of microsomes prepared from H. pylori (ATCC 43504) was measured by enzyme-coupled assay. The effects of pH, sodium azide (NaN3), N,N-dicyclohexylcarbodiimide (DCCD),
diethylstilbestrol
(DES) and bafilomycin on the microsomal ATPase activities were determined. We also investigated the effect of nigericin on the ATPase activity. Results: The ATPase showed maximum activity at pH 5.5. The activitiy was decreased by 29%, 38% and 42%
with
the addition of NaN3, DCCD and DES, respectively. Bafilomycin had little effect on the ATPase activity. ATPase activity was decreased with the addition of DES dose-dependently, while it was increased by nigericin dose-dependently. Conclusions:
These
results suggest that cell membrane of H. pylori possesses two types of proton pumps, F-type and P-type ATPases, which act as H+ ATPase.
키워드
헬리코박터 파이로리; 마이크로소옴; F형 ATPase; P형 ATPase; H+ ATPase; Helicobacter pylori; Microsomes; F type ATPase; P type ATPase; H+ ATPase;
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