인체 암세포주에서 방사선감수성의 지표간의 상호관계
Correlation Between the Parameters of Radiosensitivity in Human Cancer Cell Lines
박우윤, 민경수, 김원동,
소속 상세정보
박우윤 ( )
Chungbuk National University
민경수 ( )
Chungbuk National University
김원동 ( )
Chungbuk National University
KMID : 0859319980160020099
Abstract
목 적 : 임상에서 발생빈도가 높은 위선암 , 폐선암 , 망막세포종 , 자궁경부 편평상피암의 4 가지 인체암세포주 (MKN-45, PC-14, Y-79, HeLa)를 이용하여 방사선조사후 세포생존분획 및 세포생존곡선의 모양을 결정하는 지표를 구하고 방사선조사후 손상 회복정도를
측정하여 이들 여러 지표간의 상관관계 여부를 구명하기 위하여 본실험을 시행하였다 .
대상 및 방법 : 각 세포주의 방사선감수성을 보기 위하여 1, 2, 3, 5, 7 및 10Gy 의 방사선을 1 회 조사하였고 방사선조사후 준치사손상 회복정도를 보기 위하여 5Gy 씩 2 회의 방사선조사를 0,1, 2, 3, 4, 6 및 24 시간 간격으로 시행하였다 . 세포의 생존분획은
Sperman-K?ber 방법으로 세포집락형성능력을 측정하여 산출하였으며 생존곡선의 수학적 분석은 linear-quadratic(LQ), multitarget-single hit(MS) 모형과 mean inactivation dose( )를 이용하였다 .
결 과 : 방사선조사후의 세포생존 실험결과 2Gy 에서의 세포생존분획 (SF2)은 0.174 에서 0.85 까지 다양하게 나타났으며 Y-79 는 유의하게 낮은 SF2 를 , PC-14 는 높은 SF2 를 나타내었다 (p<0.05, t -test). LQ model 로 분석한 방사선 세포생존곡선의 분석결과
Y-79, MKN-45, HeLa, PC-14 에서 α가 각각 0.603, 0.356, 0.275, 0.102 이었고 β는 각각 0.005, 0.016, 0.025, 0.027 이었다 . MS model 로 분석한 결과는 Y-79, MKN-45, HeLa, PC-14 에서 Do 가 각각 1.59, 1.84, 1.88, 2.52 였고 n 은 0.97, 1.46, 1.52, 1.69 를 보였다. 한편 Gauss-Laguerre 방법으로 계산한 는 Y-79, MKN-45, HeLa, PC-14 에서 각각 1.62, 2.37, 2.61, 3.95 였다 . SF2 가 감소함에 따라 α값은 증가하였고 Do, 값은 감소하였으며 이들간의 Pearson 상관계수는 각각 -0.953, 0.993, 0.999 였다 (p<0.05). 분할조사에 의한 준치사손상 회복정도는 약 4 시간 내외에 포화상태에 도달하였으며 포화상태의 recovery ratio(RR)는 2 에서 3.79 사이였다 . RR 은 방사선감수성의 지표인 SF2, α,β, Do, 과 통계학적으로 유의한 상관관계를 나타내지 않았다 .
결 론 : 본 연구의 결과 네가지 인체상피암세포주의 내재적 방사선감수성은 서로 상이하였으며 Y-79 가 가장 민감하였고 , MKN-45 와 HeLa 는 각각 중등도의 방사선감수성을 나타냈으며 PC-14 는 방사선감수성이 가장 낮았다 . 이와같은 감수성의 차이는 SF2, α, Do
와 의 차이로 나타났으며 이들간에는 밀접한 상관관계를 나타내었다 . 방사선에 의한 준치사손상 회복력은 MKN-45 와 HeLa 에서 높게 나타났고 회복력과 방사선감수성과는 무관하였다 . 각 암세포주에 따르는 이와같은 지표들은 향후 방사선치료 효과를 높이기 위한 방사선생물학
실험의 기초 자료로서 이용되어 질 수 있을 것이다 .
Purpose: We conducted clonogenic assay using human cancer cell lines (MKN-45, PC-14, Y-79, HeLa) to investigate a correlation between the parameters of radiosensitivity.
Materials and Methods: Human cancer cell lines were irradiated with single doses of 1, 2, 3, 5, 7 and 10Gy for the study of radiosensitivity and sublethal damage repair capacity was assessed with two fractions of 5Gy separated with a time interval
of 0,1, 2, 3, 4, 6 and 24 hours. Surviving fraction was assessed with clonogenic assay using Sperman-K?ber method and mathematical analysis of survival curves was done with linear-quadratic (LQ), multitarget-single hit(MS) model and mean inactivation
dose( D).
Results: Surviving fractions at 2Gy(SF2) were variable among the cell lines, ranged from 0.174 to 0.85. The SF2 of Y-79 was lowest and that of PC-14 was highest(p<0.05, t-test). LQ model analysis showed that the values of α for Y-79, MKN-45, HeLa and PC-14 were 0.603, 0.356, 0.275 and 0.102 respectively, and those of β were 0.005, 0.016, 0.025 and 0.027 respectively. Fitting to MS model showed that the values of Do for Y-79, MKN-45, HeLa and PC-14 were 1.59, 1.84, 1.88 and 2.52 respectively, and those of n were 0.97, 1.46, 1.52 and 1.69 respectively. The s calculated by Gauss-Laguerre method were 1.62, 2.37, 2.61 and 3.95 respectively. So the SF2 was significantly correlated with α, Do and . Their Pearson correlation coefficiencics were -0.953 and 0.993, 0.999 respectively(p<0.05). Sublethal damage repair was saturated around 4 hours and recovery ratios (RR) at plateau phase ranged from 2 to 3.79. But RR was not correlated with SF2, α, β, Do, D.
Conclusion: The intrinsic radiosensitivity was very different among the tested human cell lines. Y-79 was the most sensitive and PC-14 was the least sensitive. SF2 was well correlated with α, Do, and . RR was high for MKN-45 and HeLa but had nothing to do with radiosensitivity parameters. These basic parameters can be used as baseline data for various in vitro radiobiological experiments.
키워드
Radiosensitivity; Sublethal damage repair; MKN- 45; PC- 14; Y- 79; HeLa
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