담관계 질환에서 세균 및 Helicobacter 감염과 담즙산 성분의 관계
The relationship of bacterial and Helicobacter infection to composition of bile acid in biliary tract diseases
소속 상세정보
이병석/Byoung Suk Lee
노임환/남승우/유 권/박현종/김정원/신지현/이종화/Im Hwan Roe/Seung Woo Nam/Kwon Yoo/Hyun Jong Park/Jung Won Kim/Ji Hyun Shin/Jong Hwa Lee
KMID : 0882420010600030215
Abstract
목적 : 정상적인 인체 담즙에서는 세균이 생장할 수 없으며 특히 담즙산 중 DCA는 세균에 대한 생장억제 작용이 있다고 알려지고 있다. 최근 담관 질환의 담즙에서 세균 외에도 Helicobacter 유전자가 흔하게 발견됨이 보고되고 있으며 Helicobacter가 담관 질환과
어떤
관계가 있는지 아직 불명확하지만 최근에는 담관 질환을 유발할 수 있는 가능성도 조심스럽게 거론되고 있다. Helicobacter는 담즙산 중 CDCA와 DCA에 매우 민감한 것으로 알려지고 있어 담관내 Helicobacter의 감염은 담즙산의 구성 변화와 관련 있을 것으로
예측된다. 이
연구의 목적은 담즙 내 Helicobacter 및 세균의 존재가 담즙산의 구성 변화와 관계 있는지 조사하였고 인체 담관 질환의 담즙에서 H. pylori의 생장 가능성을 규명하고자 하였다.
방법 : 30개의 담즙 (수술 하 담낭천자 3예, 경피 하 담관 배액 27예)에서 DNA를 추출한 후, 세균에 대한 16S rRNA 유전자와 Helicobacter genus specific 16S rRNA 유전자를 primer로 사용하여 연쇄 중합 반응법을 시행한 후 각각의 유전자 존재에 따라 3군으로
분류하였다. I군은 세균 유전자가 없는 군 (n=4), II군은 세균 유전자만 있는 군 (n=11), III군은 세균 및 Helicobacter 유전자가 모두 양성인 군 (n=15)로 하였다. 각 군의 담즙을
HPLC에 의해 CDCA, DCA, LCA, UDCA에 대하여 분석하였다. 또한 HPLC 결과 후에 CDCA 혹은 DCA가 3.0 gm/L 이상으로 정상적인 담즙과 CDCA와 DCA가 모두 극미량 (0.1 gm/L 미만)되는 담즙을 선택하여 H. pylori의 액체 배양배지에 각각 혼합하여 50% 담즙농도의
액체배지로
만든 후 H. pylori를 배양, 생장상태를 확인하였다.
결과 : I군에서 CDCA, DCA는 0.1 gm/L 미만의 극미량을 보이는 경우는 없었으나 II군에서는 DCA가 극미량으로 있는 경우가 90.9% (10/11)로 I군에 비해 유의하게(p<0.01) DCA 농도가 감소되어 있었으며 CDCA는 27.3% (3/11)에서 극미량을 보였다. III군에서 DCA는
100%
(15/15)에서 극미량으로 존재하여 I군과 유의한 차이가 있었으며 (p<0.01), CDCA는 60% (9/15)에서 극미량을 보였다. 또한 H. pylori는 CDCA 혹은 DCA중 정상적인 농도를 보였던 담즙으로 만든 액체배지에서는 전혀 생장하지 못하였으나 CDCA와 DCA가 모두 극미량인
담즙으로 만든 액체배지에서는 활발히 생장하였다.
결론 : 담관질환의 담즙산의 구성과 농도는 정상상태와는 매우 다르게 변화하는 것으로 보이며 세균 감염의 방어와 가장 관계깊은 담즙산은 DCA로 Helicobacter 및 세균 감염된 담즙에서 DCA가 극미량으로 존재하였다. Helicobacter는 DCA와 CDCA가 매우 낮은 인체
담즙에서는 활발히 생장하였다. 따라서 인체의 담관 질환에서 담즙산의 구성이 바뀌면 Helicobacter가 생존할 수 있는 가능성이 있다고 보이지만 더 많은 연구가 필요할 것으로 보인다.
Background : Bacterial and Helicobacter gene were commonly detected in diseased human bile, although the meaning of the presence of Helicobacter in biliary tract is still unclear. The aim of this study was to evaluate the changes of bile acid
composition in bacterial and Helicobacter infected bile, and to determine whether Helicobacter pylori might grow in human bile or not.
Methods : Thirty bile samples were obtained by percutaneous transhepatic biliary drainage or gallbladder puncture during cholecystectomy. According to the polymerase chain reaction analysis using bacterial 16S rRNA and Helicobacter genus specific
16S
rRNA primers, 3 groups were divided; Group Ⅰ; no presence of any bacterial DNA, Group Ⅱ; positive bacterial DNA only, Group Ⅲ; positive bacterial and Helicobacter DNA. Bile acid analysis for deoxycholic acid (DCA), chenodeoxycholic acid
(CDCA),
lithocholic acid (LCA), and ursodeoxycholic acid (UDCA) was performed by high performance liquid chromatography. And then Helicobacter pylori was tried to culture in broth mixed with human bile at a final bile concentration of 50%.
Results : The concentrations of DCA in group II and III were very low and significantly reduced compared to group I (p<0.01, respectively). The concentrations of LCA or UDCA were not shown any relationships between groups. Helicobacter pylori has
grown
actively in the broth mixed with human bile containing both of less than 0.1 gm/L of DCA and CDCA, compared to no growth in media mixed with human bile containing more than 3.0 gm/L of DCA and/or CDCA.
Conclusion : DCA seems to have the strongest antibacterial effect. Helicobacter pylori is likely to grow in human bile containg very low concentrations of CDCA and DCA.
키워드
Bile; Bile acid; Helicobacter pylori; Biliary tract diseases;
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