위선암 환자의 말초혈액에서 역전사 중합효소 연쇄반응을 이용한 Cytokeratin 20 양성 미세 전이 암세포의 진단
Detection of disseminated tumor cells using reverse transcriptase PCR for cytokeratin 20 in peripheral blood isolates from gastric cancer patients
이승훈, 진종율, 송치원, 이희진, 박재후, 박영세, 백창렬, 이준욱, 우영식, 김희중, 김춘추,
소속 상세정보
이승훈 ( Lee Seung-Hoon )
가톨릭대학교 의과대학 성가병원 내과학교실
진종율 ( Jin Jong-Youl )
가톨릭대학교 의과대학 성가병원 내과학교실
송치원 ( Song Chi-Won )
가톨릭대학교 의과대학 성가병원 내과학교실
이희진 ( Lee Hee-Jin )
가톨릭대학교 성가병원 임상의학연구소
박재후 ( Park Jae-Hoo )
울산대학교병원 내과
박영세 ( Park Young-Se )
강남 차병원 산부인과
백창렬 ( Paik Chang-Nyol )
가톨릭대학교 의과대학 성가병원 내과학교실
이준욱 ( Lee Joon-Wook )
가톨릭대학교 의과대학 성가병원 내과학교실
우영식 ( Woo Yeong-Sik )
가톨릭대학교 의과대학 성가병원 내과학교실
김희중 ( Kim Hee-Jung )
가톨릭대학교 의과대학 성가병원 내과학교실
김춘추 ( Kim Chun-Choo )
가톨릭대학교 의과대학 성가병원 내과학교실
KMID : 0882420010600060514
Abstract
목적 : 암의 전이는 암의 근치 절제등의 치료후 중요한 문제점 중의 하나이며 전이의 증명은 이미 고형암이 발견되었을 때 이루어지는 검사이다. 임상적으로 표현되지 않는 암세포의 파종은 면역세포학적 검사나 PCR 같은 분자생물학적 방법 등을 이용하여 발견할 수 있다. 본 연구에서는 22명의 위암환자를 대상으로 하여 말초혈액에서 CK-20 RT-PCR을 이용해 말초 혈액 내에서 미세 전이암을 찾아낼 수 있는지 알아보고 또한 예후와 관련성이 있는지를 알아보고자 하였다.
방법 : 조직학적 위암으로 진단된 환자 중 치료를 받지 않은 환자 22명과 정상 대조군으로 암의 병력이 없는 건강한 동료 의사 10명의 혈액 10 mL를 채취하여 헤파린으로 처리하였다. 밀도 경사에 따라 유핵세포들을 따로 분리하였고 이 유핵 세포들로부터 순수 RNA를 분리하여 CK 20 특이 primers를 이용하여 역전사 중합효소 연쇄반응에 사용하였다.
결과 : 22명의 위암 환자 중 말초 혈액 RT-PCR 결과 CK 20이 양성으로 나타난 경우는 3명(13.6%)이었고 10명의 정상 대조군에서는 모두 음성이었다.
결론 : 22명의 위암 환자의 말초 혈액을 대상으로 CK 20에대한 역전사 중합효소 연쇄반응을 실시하여 조사한 결과 3명 (13.6%)에서 양성반응을 보여 미세 잔류암을 찾아 낼수 있는 좋은 방법으로 생각되었다. 그러나 본 연구에서는 병기에 따른 양성률의 차이나 생존률에 영향을 미치는 뚜렷한 결과는 발견하지 못하였다. 따라서 좀 더 많은 수의 환자를 대상으로 연구할 필요가 있을 것으로 생각된다.
Background : The development of metastasis in cancer is one of the main problems after primary tumor resection. The identification of metastases is only possible in the follow-up investigation when there is already a solid tumor mass. Subclinical tumor cell dissemination can be detected by immunocytological staining of cells or by other molecular biological methods, like PCR. We investigated 22 peripheral blood isolates from gastric cancer patients with a cytokeratin (CK) 20 specific nested reverse transcriptase PCR (RT-PCR) for the detection of disseminated tumor cells at the time of diagnosis.
Methods : Fresh heparinized peripheral bloods (about 10 mL) were obtained from 22 gastric cancer patients and 10 healthy doctors as controls. Nucleated cells were isolated by a density gradient method. RNA was isolated and then subjected to RT-PCR with CK 20 specific primers.
Results : In gastric cancer, 3 of 22 (13.6%) peripheral blood isolates yielded a CK 20 mRNA positive result in a stage undependent manner.
Conclusion : We detected disseminated tumor cells in the peripheral blood isolated using CK 20 specific nested RT-PCR method. Studies on a larger scale are needed for further investigation on the relationship between positive rates of CK 20 mRNA and survival rates of stomach cancer, according to cancer stages.
키워드
Stomach neoplasms;Keratin;Reverse transcriptase polymerase chain reaction;
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